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本试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制PAGE凝胶。本试剂盒约可配制50块常规大小的PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶)。

1. 过硫酸铵配制成10%溶液后，应尽快用完并-20℃保存，若4℃放置则不要超过一个星期。尽量现配现用。
   
2. TEMED替代物使用后请盖紧瓶盖，并保证避光保存。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节TEMED替代物的用量(加倍使用可以节省1/3左右的时间，建议凝胶时间保证在30min以上，有助于SDS-PAGE检测的效果)，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
   
3. 温度较低时，SDS可能析出。需水浴温育，并在完全溶解和混匀后使用。
   
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度，再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)：不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围：
   

   SDS-PAGE分离胶浓度	最佳分离范围
   6%	50～150kD
   8%	30～90kD
   10%	20～80kD
   12%	12～60kD
   15%	10～40kD

   注：如遇秋冬季节气温较低，分离胶与浓缩胶配胶时可增加过硫氨酸和TEMED替代物的量，推荐添加体积是说明书中推荐加入体积的2倍，如：6%分离胶5mL体积中过硫氨酸体积为0.1mL，TEMED替代物体积为0.01mL，以此类推。
   
2. 按照如下表格配制SDS-PAGE的分离胶：
   

   成分	配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
   6%胶	5	10	15	20	30	50
   蒸馏水	2.595	5.19	7.785	10.38	15.57	25.96
   30% Acr-Bis	1.0	2.0	3.0	4.0	6.0	10.0
   1.5M Tris-HCl,pH8.8	1.3	2.6	3.9	5.2	7.8	13
   10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
   10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
   TEMED替代物	0.005	0.01	0.015	0.02	0.03	0.04
   成分	配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
   8%胶	5	10	15	20	30	50
   蒸馏水	2.295	4.69	7.085	9.48	14.17	23.66
   30% Acr-Bis	1.3	2.6	3.9	5.2	7.8	13
   1.5M Tris-HCl,pH8.8	1.3	2.6	3.9	5.2	7.8	13
   10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
   10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
   TEMED替代物	0.005	0.01	0.015	0.02	0.03	0.04
   成分	配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
   10%胶	5	10	15	20	30	50
   蒸馏水	1.895	3.79	5.685	7.58	11.37	18.96
   30% Acr-Bis	1.7	3.4	5.1	6.8	10.2	17.0
   1.5M Tris-HCl,pH8.8	1.3	2.6	3.9	5.2	7.8	13
   10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
   10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
   TEMED替代物	0.005	0.01	0.015	0.02	0.03	0.04
   成分	配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
   12%胶	5	10	15	20	30	50
   蒸馏水	1.595	3.19	4.785	6.38	9.57	15.96
   30% Acr-Bis	2.0	4.0	6.0	8.0	12.0	20.0
   1.5M Tris-HCl,pH8.8	1.3	2.6	3.9	5.2	7.8	13
   10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
   10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
   TEMED替代物	0.005	0.01	0.015	0.02	0.03	0.04
   成分	配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
   15%胶	5	10	15	20	30	50
   蒸馏水	1.095	2.19	3.285	4.38	6.57	10.96
   30% Acr-Bis	2.5	5.0	7.5	10.0	15.0	25.0
   1.5M Tris-HCl,pH8.8	1.3	2.6	3.9	5.2	7.8	13
   10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
   10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
   TEMED替代物	0.005	0.01	0.015	0.02	0.03	0.04

   
   
3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称堆积胶、积层胶或上层胶)
   

   成分	配制不同体积SDS-PAGE浓缩胶所需各成分的体积(毫升)
   5%胶	2	3	4	6	8	10
   蒸馏水	1.371	2.054	2.742	4.108	5.484	6.85
   30% Acr-Bis	0.332	0.498	0.664	0.996	1.328	1.66
   1.0M Tris-HCl,pH6.8	0.252	0.378	0.504	0.756	1.008	1.26
   10% SDS	0.02	0.03	0.04	0.06	0.08	0.1
   10%过硫酸铵	0.02	0.03	0.04	0.06	0.08	0.1
   TEMED替代物	0.005	0.01	0.01	0.02	0.02	0.03